OSNA / RD-100i
6Pagine

OSNA – la nuova generazione nell’analisi del linfonodo sentinella nel carcinoma mammario

RD-100i OSNA – la nuova generazione nell’analisi del linfonodo sentinella nel carcinoma mammario La biopsia del linfonodo sentinella si sta rapidamente affermando come la procedura chirurgica d’elezione per pazienti affette da carcinoma mammario in stadio precoce con linfonodi clinicamente negativi. L’analisi intraoperatoria tradizionale del linfonodo sentinella (SLN) è stata finora eseguita effettuando sezioni congelate oppure tramite analisi citologia di imprint con rapida colorazione E-E (ematossilina ed eosina). La sensibilità di questi metodi istopatologici non è particolamente...

Tecnologia avanzata OSNA è un saggio di dosaggio diagnostico molecolare automatiz- zato che utilizza una tecnologia di amplificazione rapida degli acidi nucleici (RT-LAMP*) per rilevare il livello di espressione di mRNA della citocheratina 19 (CK19). La citocheratina 19 è un marcatore delle cellule epiteliali normalmente non presente nel tessuto dei linfonodi. La quantità di mRNA della CK19 è correlata alle dimensioni dei foci metastatici. La base per la valutazione del risultato del paziente è una curva standard con tre diversi calibratori. Durante lo sviluppo del metodo OSNA, Sysmex ha...

Tecnologia RT-LAMP L'innovativa tecnologia di amplificazione «RT-LAMP» è una rapida procedura isotermica che presenta numerosi vantaggi rispetto ai metodi di amplificazione PCR tradizionali. La reazione di amplifica- zione avviene in i6 minuti, senza richiedere alcuna estrazione e preventiva purificazione dell'RNA. Le condizioni per la prepara- zione dei campioni e la particolare struttura del primer sono appo- sitamente studiate per garantire elevata specificità ed evitare risul- tati falsi positivi. In RT-LAMP si utilizzano sei diversi primers, scelti appositamente al fine di evitare...

Studi di validazione e dati clinici Il metodo OSNA è stato valutato in numerosi studi multicentrici condotti in diversi paesi [1 –5]. In ciascuno di questi studi, OSNA è stato posto a confronto con un esame istopatologico approfondito. Dai linfonodi sono state tagliate 4 sezioni di 1 o 2 mm di spessore. Le sezioni sono state utilizzate alternativamente al dosaggio OSNA oppure sottoposte a esame istologico multilivello su sezioni permanenti. Sono state prelevate sezioni da 5 livelli con porzioni di cute di 100, 200 o 250 µm. Per riassumere, sono stati analizzati 2313 linfonodi e ottenuti i...

Strumento Metodo Parametro Tecnologia Rilevamento Parametri visualizzati Cadenza analitica Range tessuto/campione Volume campione Reagenti Salvataggio dati Controllo Qualità Interfacce sistema di rilevamento RD-100i dell’amplificazione genica OSNA (One Step Nucleic Acid Amplification, amplificazione in un’unica fase degli acidi nucleici) mRNA della CK19 RT-LAMP (amplificazione isotermica mediata da loop della transcriptasi inversa) variazione della luce trasmessa causata dalla precipatazione di pirofosfato di magnesio a seconda del grado della reazione CK19 Q (risultato qualitativo per la...